熒光定量PCR技術是通過熒光染料或熒光標記的特異性探針,對PCR產(chǎn)物進行標記跟蹤,實時監(jiān)控反應過程。隨著PCR反應的進行,反應產(chǎn)物不斷累積,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一次熒光強度信號,這樣就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,結合相應的軟件對產(chǎn)物進行分析,可以得到熒光擴增曲線,計算待測樣品初始模版的量。實時熒光定量PCR技術是一次由定性技術向定量技術的飛躍,運用該項技術,可以對DNA、RNA樣品進行相對定量、定量和定性分析。
服務項目
1.相對定量
包括RNA提取、反轉錄和擴增,采用SYBRGreenI法和TaqMan探針法兩種方式,一般采用2-ΔΔCt法進行計算。每個樣本重復三次,一般情況我公司提供內參基因引物。
2.定量
需要制備標準品并建立標準曲線,然后檢測目的樣本中的基因,比對標準曲線得到基因準確拷貝數(shù)。